全自動酶標(biāo)儀的光源燈發(fā)出的光波經(jīng)過濾光片或單色器變成一束單色光，進入塑料微孔極中的待測標(biāo)本。該單色光一部分被標(biāo)本吸收，另一部分則透過標(biāo)本照射到光電檢測器上，光電檢測器將這一待測標(biāo)本不同而強弱不同的光信號轉(zhuǎn)換成相應(yīng)的電信號。電信號經(jīng)前置放大，對數(shù)放大，模數(shù)轉(zhuǎn)換等信號處理后送入微處理器進行數(shù)據(jù)處理和計算，由顯示器和打印機顯示結(jié)果。

 

　　微處理機還通過控制電路控制機械驅(qū)動機構(gòu)X和Y方向的運動來移動微孔板，從而實現(xiàn)自動進樣檢測過程。而另一些自動酶標(biāo)儀則是采用手工移動微孔板進行檢測，因此省去了X、Y方向的機械驅(qū)動機構(gòu)和控制電路，從而使儀器更小巧，結(jié)構(gòu)也更簡單。

　　一般來說，全自動酶標(biāo)儀使用時分為半自動和全自動兩種，不過這兩者的工作原理基本上是一致的，核心都是比色計，也就是用比色法來進行分析。

　　全自動酶標(biāo)儀的測定波長研究：

　　一般酶標(biāo)儀的測定波長在400-750nm或800nm之間，則可以滿足ELISA的顯色測定。目前國內(nèi)常見的ELISA試劑盒所使用的標(biāo)記用酶均為辣根過氧化物酶（HRP），底物通常為四甲基聯(lián)苯胺（TMB）和鄰苯二胺（OPD），其在過氧化氫溶液的存在下，經(jīng)HRP作用，分別氧化為2，2，-二氨基偶氮苯（DAB）和聯(lián)苯醌。當(dāng)pH值為5.0左右時，DAB在450nm波長處有大吸收，當(dāng)pH值降為L 0時，大吸收波長移至492 nm，同時摩爾消光系數(shù)變大，顯色加深，因而常用強酸如硫酸或鹽酸終止反應(yīng)。TMB的氧化產(chǎn)物聯(lián)苯醌在波長450nm處有大消光系數(shù)，如果HRP量少，H:O:和TMB過量時，則形成藍(lán)色的陽離子根。降低pH，即可使藍(lán)色的陽離子根轉(zhuǎn)變?yōu)辄S色的聯(lián)苯醌，使用硫酸作為終止劑可使產(chǎn)物穩(wěn)定90min.因此，450nm和492 nm兩個波長是目前ELISA測定常用的。

　　各種酶標(biāo)儀都配有放置濾光片的可自動轉(zhuǎn)換的部件，可以同時安裝6-8片濾光片，所配備的濾光片均應(yīng)包括上述兩個波長，有的酶標(biāo)儀以490nm濾光片替代492nm濾光片，影響不大。除了這兩個基本濾光片外，考慮到雙波長比色的需要，還應(yīng)有620nm或630nm或650nm和405nm波長的濾光片，其他濾光片可根據(jù)實際需要選擇。有時實驗室希望用酶標(biāo)儀作微量生化測定，故酶標(biāo)儀廠家對其生產(chǎn)時擴展了紫外檢測功能，此時需要一個340nm波長濾光片。此時，酶標(biāo)儀的測定波長范圍就成為340-750nm或800nm。